研究人员开发了一个指南,帮助实验室标准化从干细胞中产生成熟的类肝细胞(hepatic-like cells,HPCs)的方法,并将HPCs的基因表达与实际人体肝脏组织进行比较。这种中度的高通量的方案可以相对快速地评估干细胞分化的有效性,并有助于指导再生医学应用中分化条件的优化。该操作指南及其影响发表在《Stem Cells and Development》杂志上。
图片来源:Stem Cells and Development
这个名为"Guide to the Assessment of Mature Liver Gene Expression in Stem Cell-Derived Hepatocytes"的指南由卡罗林斯卡医学院的Stephen Strom、匹兹堡大学的Alejandro Soto-Gutierrez以及来自伊朗干细胞生物学研究所的同事共同撰写。
研究人员使用实时定量聚合酶链反应(rt-qPCR)检测了60多个基因在胎儿和成熟人类肝脏样本中的mRNA表达情况,并将其归一化为内参。
他们测量了自己实验室和从商业实验室购买的iPCs中的基因表达。评估的基因包括肝脏特异性血浆蛋白、细胞色素P450酶、转运体、多药耐药蛋白的基因,以及多能性和iPCs分化为不同细胞类型的能力的基因。
Stem Cells and Development杂志主编、来自密西根州底特律韦恩州立大学医学院Carman and Ann Adams儿科的Graham C. Parker说道:"能够引导干细胞群向目标成熟的细胞类型分化的能力和演示这一过程的持久性和有效性仍然是大多数干细胞生物学家无法完成的事情,而且更令人担忧的是这一领域继续忍受着一些没有证据的论文。在这项具有里程碑意义的论文中,Stephen Strom和他的同事为其他实验室提供了一个基准技术,来比较他们的干细胞来源的类肝细胞和实际的人类肝脏样本。"
参考资料:
Mihaela Zabulica et al, Guide to the Assessment of Mature Liver Gene Expression in Stem Cell-Derived Hepatocytes, Stem Cells and Development (2019). DOI:10.1089/scd.2019.0064
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