文献盘点：冷冻几十年的间充质干细胞仍有长效活性，已被用来改善多种健康问题

近年来，临床证实，经过长期冷冻保存的间充质干细胞，其临床应用潜力并未因时间而“冻结”，这为应对多种健康问题提供了新的选择：

（1）冷冻的间充质干细胞具有长效的活性：采用先进的冷冻保存技术，间充质干细胞在液氮中储存长达20余年后，复苏的干细胞仍能保持高活力与完整功能，其关键的旁分泌修复因子保有率超过80%。

（2）冷冻干细胞发挥作用的与机制：主要源于保留完好的旁分泌功能，通过释放抗炎因子、生长因子等，调节局部微环境，实现抑制炎症、促进组织修复与再生，而非单纯依赖细胞直接替代。

（3）冷冻的间充质干细胞被越来越多的应用于临床：在骨关节炎和心血管疾病两大领域，冷冻间充质干细胞显示出与新制备细胞相当的长期疗效。例如，在膝骨关节炎患者中，能持续改善疼痛与关节功能达1年以上；对心力衰竭患者，可显著提升心脏泵血功能。

近年来，一系列临床研究揭示 [1-3]：冷冻保存长达20余年的间充质干细胞，经复苏后仍然保持着高度的活性和功能完整性。

更令人振奋的是，这些经过长期冷冻保存的细胞，在治疗骨关节炎、心血管疾病等难治性疾病中展现了与新制备细胞相当的疗效。

随着再生医学的迅猛发展，间充质干细胞疗法成为治疗退行性疾病、炎症性疾病和自身免疫疾病的新方向。

然而，这些“活体生物药物”的有效保存成为临床应用的关键环节。冷冻保存技术应运而生，为干细胞的长期存储提供了可能。

研究表明，经过优化配方和严格程序的冷冻保存，间充质干细胞能在液氮中长期保持其生物学特性。

最新研究证实，即使在超低温环境中储存长达20余年，经过科学复苏程序后，这些细胞的存活率仍能保持在80%以上，且细胞的增殖能力、多向分化潜能和免疫调节功能均未受到明显损害[4]。

这一发现意义重大，意味着通过冷冻保存的干细胞库，科学家和医生能够随时获取有活性的治疗细胞，该技术为突发性疾病或急需干细胞治疗的患者提供即时可用的“现货”疗法。

骨关节炎作为一种常见的退行性关节疾病，传统治疗方法效果有限，冷冻保存的间充质干细胞为这类患者提供了新选择。

2024年发表于《Cytotherapy》的一项随机对照研究[2]提供了有力证据，首次探讨了单次注射冷冻保存的脐带间充质干细胞（UC-MSCs）对膝骨关节炎的长期疗效。其中脐带间充质干细胞的制备和保存均在GMP环境下进行，以保障质量和安全性。

研究结果表明：与曲安奈德组相比，膝关节炎患者接受关节腔内注射GMP环境下制备的脐带间充质干细胞制剂，在WOMAC评分（包括三个子评分——疼痛、僵硬和功能）、NRS疼痛评分和SF-36概况从基线到12个月均有显著改善（p < 0.05），并且没有报告严重的不良事件。

接受细脐带间充质干细胞治疗的患者在SF-36概况上经历了显著改善（p < 0.05）。

图片来自文献[2]

此外，另一项研究直接比较了新鲜和冷冻保存的脐带间充质干细胞对大鼠骨关节炎的治疗效果[6]，该研究通过建立大鼠骨关节炎模型，发现无论是新鲜还是冷冻的人脐带间充质干细胞，均能有效改善关节肿胀、减轻软骨病理损伤，并调节基质金属蛋白酶（MMP-13）及其抑制因子（TIMP-1）的表达。

最关键的是，研究明确指出 “两组治疗骨关节炎差异无统计学意义” ，直接证明了冷冻保存并未降低干细胞的治疗效果。

心血管疾病是全球头号健康杀手，每年夺走约1700万人的生命。冷冻保存的间充质干细胞在这一领域的应用研究也取得了突破性进展。

2025年《World Journal of Stem Cells》上发表的一项系统综述分析了7项随机对照试验的数据，共纳入285名心血管疾病患者[1]。

结果显示，接受冷冻保存间充质干细胞治疗的患者，在6个月内左心室射血分数平均提升2.11%。

这是衡量心脏泵血功能的关键指标，其改善意味着心脏功能的实质性提升。尤为值得注意的是，当使用脐带来源的间充质干细胞时，改善幅度可达3.53%，显著优于骨髓来源的干细胞。这可能与脐带干细胞更“年轻”、增殖和分泌能力更强有关。

在安全性方面，治疗组与对照组在严重心脏不良事件发生率上无显著差异，表明冷冻保存干细胞的治疗是安全的。这一发现为心血管疾病的冷冻干细胞治疗提供了强有力的支持。

图片来自文献[1]

冷冻保存的间充质干细胞如何发挥治疗效果？这主要归功于其多重修复机制。虽然细胞在冷冻复苏后，一部分直接参与组织修复的能力可能有所下降，但其旁分泌效应仍然保持强劲。

间充质干细胞通过释放多种生物活性分子，如生长因子、细胞因子和外泌体，调节局部微环境，促进组织修复。这些旁分泌因子在抗炎与免疫调节、促进细胞增殖与基质合成等方面发挥着关键作用。

下表概括了冷冻保存间充质干细胞复苏后的多重修复机制[7]：